Idishni xona haroratida 2-3 daqiqa davomida inkubatsiya qiling. Qattiq yopishgan hujayralar 37 °C da tezda ajratilishi mumkin. Mikroskop ostida hujayralarni kuzating. Ajratilgan hujayralar mikroskop ostida yumaloq va sinuvchan ko'rinadi.
Agar hujayralarni juda uzoq vaqt davomida tripsizizatsiya qilsangiz nima bo'ladi?
Tripsin kontsentratsiyasi juda yuqori bo'lgan hujayralarni juda uzoq vaqt davomida inkubatsiya qilish hujayra membranalarini shikastlaydi va hujayralarni nobud qiladi. Agar tripsin kontsentratsiyasiga ishonchingiz komil bo'lmasa, past konsentratsiyadan foydalaning.
Hujayralarni qanday qilib tripsizizatsiya qilasiz?
Hujayralarni qayta suspenziya qilish uchun hujayra suspenziyasini sekin pipetlash orqali boʻlaklarni parchalash mumkin. Agar kerak bo'lsa, hujayralar soni va/yoki subkulturalash uchun qo'shimcha suyultirish mumkin.
Hujayralar biriktirilishi uchun qancha vaqt ketadi?
birinchi katakchalar 3-5 daqiqadan keyin biriktiriladi! Mening tajribamga ko'ra, aksariyat EClar 10-20 daqiqadan so'ng biriktirilgan. Qanchalik uzoq kutsangiz, biriktirma shunchalik mustahkam bo'ladi.
Hujayralarni ikki kun ketma-ket tripsizlashtirish yomonmi?
Ha, agar siz hujayralarni 24 soat boʻlingandan keyin uzluksiz ravishda tripsinizlanayotgan boʻlsangiz, bu zararli. Boʻlinishni 48 soatdan keyin bajarish tavsiya etiladi. … Siz hujayralarni morfologiyasi yaxshi bo'lguncha ushlab turishingiz mumkin (Bu sizning hujayra turiga bog'liq, ba'zi hujayralar 80 tagacha, ba'zilari esa 10 tagacha bo'lishi mumkin).
